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核酸相关>反转录与PCR>PCR相关( PlusDNA聚合酶)

  • 产品编号: HKM71

  • 产品分类:微生物试剂

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产品名称:核酸相关>反转录与PCR>PCR相关(  PlusDNA聚合酶)

 Plus DNA Polymerase,是一种以嗜热古细菌DNA聚合酶(hyperthermophilic archaeon
bPyrococcus-like DNA polymerase)为基础通过突变等改造而获得的超高性能DNA聚合酶,它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
 Plus DNA Polymerase扩增速度极快,扩增小于6kb的DNA片段时,延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。 Plus DNA Polymerase由于其超快的扩增速度,可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
 Plus DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶。 Plus DNA Polymerase不仅可以非常高效地催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应,它同时还具有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)它的错误发生概率比Taq酶要低26倍,比pfu酶要约低3倍(参考表1)。
 

表1.  Plus DNA Polymerase的主要性能与Taq酶及同类产品的比较。
 

Product Name Concentration Manufactur Velocity Target Size Fidelity Product end
Taq 5U/μl Various 1min/kb <3kb 2.3×10-5/nt/cycle 3'overhangs
Pfu 5U/μl Various 2min/kb <5kb 2.6×10-6/nt/cycle Blunt
Platinum Taq 5U/μl Thermo 30s/kb 15kb 3.8×10-6/nt/cycle 3'overhangs
Phusion HF 2U/μl Thermo 15-30s/kb 20kb 4.4×10-7/nt/cycle Blunt
LongAmp Taq 2.5U/μl NEB 50s/kb 30kb 1.2×10-5/nt/cycle 3'overhangs
Phusion HF 2U/μl NEB 15-30s/kb 20kb 4.6×10-7/nt/cycle Blunt
PfuUltra HF 2.5U/μl Agilent 1-2min/kb 17kb 1.3×10-6/nt/cycle Blunt
PfuUltra II FH - Agilent 15-30s/kb 19kb 1.2×10-6/nt/cycle Blunt
KOD Dash 2.5U/μl TOYOBO 30s/kb 18kb 5.8×10-6/nt/cycle 3'overhangs
KOD FX 1U/μl TOYOBO 30s-1min/kb 40kb 2.1×10-6/nt/cycle Blunt
 Plus 2.5U/μl Beyotime 15-60sec/kb >12kb 4.4×10-7/nt/cycle Blunt
 Plus 2.5U/μl Beyotime 15-60sec/kb >12kb 2.2×10-6/nt/cycle 3' overhangs

 Plus DNA Polymerase的扩增长度长,可以达到12kb。 Plus DNA Polymerase非常适合长片段DNA的扩增,扩增出来的片段可以轻松达到12kb(参考图1和表1),更长片段的扩增效果未经测试。 Plus DNA聚合酶可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增,因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。图1.  Plus DNA polymerase以λDNA为模板,PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图。
来源: Plus DNA Polymerase通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。 Plus DNA polymerase扩增出来的DNA片为双粘端,可以直接用于T载体克隆。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid
insoluble material in 30 minutes at 74°C。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v)
glycerol。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使 Plus DNA Polymerase失活。
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
PCR反应非常灵敏,在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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