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核酸相关>DNA操作>修饰酶 DNA末端平滑试剂盒

  • 产品编号: HKM24

  • 产品分类:微生物试剂

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产品名称:核酸相关>DNA操作>修饰酶   DNA末端平滑试剂盒 

产品简介:DNA末端平滑试剂盒(DNA Blunting Kit)是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'的DNA外切酶活性,用于将酶切或PCR等反应后产生的粘末端转变为平末端的试剂盒。经过本试剂盒处理产生的平末端DNA片段可以用于常规的平端连接反应。
      粘末端有两种,一种为5'端突出末端,另外一种为3'端突出末端。本试剂盒可以将5'端突出末端补平,也可以将3'端突出末端削平(也称打平)。
      当末端为5'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其5'→3'DNA聚合酶活性将末端补平;当末端为3'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其3'→5'DNA外切酶活性将末端削平。
      Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT, 84mM(NH4)2SO4
      本试剂盒可以进行20个常规的末端平滑化反应。
 

使用说明:
1. 参考如下表格设置反应体系:
 

Reaction Buffer(5X) 4μl
dNTP Mixture(2.5mM each) 0.8μl
DNA 1μg
补充无核酸酶的去离子水 至19μl
T4 DNA Polymerase(1U/μl) 1μl


2. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3. 11℃孵育20分钟,或室温(20-25℃)孵育5分钟。
4. 70℃孵育10分钟终止反应。随后可直接用于连接反应或纯化后用于连接反应。如果不直接用于后续反应,可以在-20℃保存。

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项: 
      使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 
上海化科实验器材有限公司主要生产经营:实验室器材,玻璃仪器,实验室耗材,生物耗材,化学试剂,微生物试剂,样品瓶,包装瓶,实验室设备,仪器仪表等。
广泛服务于:科研,制药,生物,生命科学,教育,污水处理,食品与饮料,电子,轻工业,矿业,石油天然气,石油化学工业,工业品仪器,环保工程等行业。
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