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核酸相关>DNA操作>内切酶与外切酶 PstI 1000U

  • 产品编号: HKM15

  • 产品分类:微生物试剂

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产品名称:核酸相关>DNA操作>内切酶与外切酶 PstI 1000U

产品介绍:80℃ 20 分钟只能使不超过10U的酶失活,酶过多则不能被充分失活。
酶储存液组成为:10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃),200mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.15% Triton X-100,0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。
1X Buffer O组成为:50mM Tris-HCl(pH7.5 at 37℃),10mM MgCl2,100mM NaCl,0.1mg/ml BSA。
1X Buffer Y组成为:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM magnesium
acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA。
酶切和连接效率:50倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut)。
活性单位定义:在37℃,50微升反应体系中反应1小时,将1微克的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位,即1U。

 

使用说明:
1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行:

 
待酶切DNA 不超过1μg
双蒸水或Milli-Q水 适量
10X Buffer O 2μl
PstI 0.5-1μl
总体积 20μl
37℃孵育1小时或更长时间


说明:请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够,但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜,可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
2. 双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。


保存条件:
-20℃保存。
注意事项: 
内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


上海化科实验器材有限公司主要生产经营:实验室器材,玻璃仪器,实验室耗材,生物耗材,化学试剂,微生物试剂,样品瓶,包装瓶,实验室设备,仪器仪表等。
广泛服务于:科研,制药,生物,生命科学,教育,污水处理,食品与饮料,电子,轻工业,矿业,石油天然气,石油化学工业,工业品仪器,环保工程等行业。
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